Дип-слайды: как проверить СОЖ на бактерии
Дип-слайд показывает, сколько бактерий и грибков живёт в эмульсии, ещё до того, как появится запах. Пластину с питательной средой на 5-10 секунд опускают в СОЖ, выдерживают в тепле от одних до трёх суток и сравнивают выросшие колонии с картинками в таблице производителя. Результат читают в КОЕ/мл и по нему решают: продолжать обычный уход, корректировать эмульсию, вводить биоцид или менять жидкость.
Что такое дип-слайд и что он показывает
Это пластиковая пластина в прозрачной пробирке. У дип-слайдов Mikrocount combi из нашего каталога одна сторона покрыта TTC-агаром для бактерий, другая агаром с бенгальским розовым для дрожжей и плесени. Одна пластина даёт сразу два результата, в упаковке 10 пробирок. Специального лабораторного оборудования и подготовки по микробиологии не нужно.
КОЕ означает колониеобразующие единицы. Каждая колония на агаре вырастает из одной клетки или небольшой группы клеток, и по плотности колоний оценивают, сколько микробов было в миллилитре жидкости. Оценка идёт порядками: 10³, 10⁴, 10⁵ и так далее, то есть тысяча, десять тысяч, сто тысяч КОЕ/мл.
У метода есть ограничение. Дип-слайд показывает микробов, которые плавают в эмульсии, а большая их часть живёт в биоплёнке на стенках бака, в трубах и в шламе на дне. По данным Master Fluid Solutions, в циркулирующую пробу попадает меньше 1 % микроорганизмов системы. Поэтому хороший результат не отменяет чистку бака, а быстрый рост после обработки говорит о том, что в системе остался очаг заражения.
Как взять пробу
- Пробу берут из работающей системы. Перед тестом перемешайте бак, чтобы на пластину не попала плёнка постороннего масла (так советует HSE), или подставьте пластину под струю из сопла.
- Открутите крышку и выньте пластину, не касаясь агара пальцами.
- Опустите пластину в эмульсию или подержите в струе 5-10 секунд. Обе стороны агара должны полностью смочиться. Если струя под сильным давлением, держите пластину осторожно, чтобы агар не оторвался.
- Дайте лишней жидкости стечь, последние капли промокните о чистую бумагу нижним краем пластины.
- Вставьте пластину обратно и плотно закрутите крышку. Подпишите пробирку: станок, дата, время.
Если проба налита в стакан, жидкость перед погружением пластины тщательно перемешивают. Погружение не подходит для густых жидкостей вроде красок, но рабочие эмульсии СОЖ к ним не относятся.
Инкубация: температура и время
Условия берут из инструкции производителя слайдов. Для Mikrocount combi они такие:
- бактерии (TTC-агар): 24-48 часов при 27-30 °C, при комнатной температуре результат обычно читается через 2-4 дня; медленно растущие бактерии проверяют повторно ещё через 48 часов;
- дрожжи и плесень: после 72 часов в инкубаторе, при комнатной температуре через 4-7 дней.
Производитель оговаривает, что температура инкубации должна быть по возможности близка к реальной температуре жидкости в станке. HSE советует пользоваться небольшим инкубатором, чтобы каждый тест шёл при одной и той же температуре и результаты можно было сравнивать между собой. Пробирку при этом не открывают: результат читают через стенку.
Неиспользованные слайды хранят закрытыми при комнатной температуре около 20 °C, без сквозняков, света и мороза. Конденсат на дне пробирки результату не мешает, если агар не пересох. Пластину, на которой ещё до использования появился рост, выбрасывают.
Как читать результат
После инкубации плотность колоний на каждой стороне сравнивают с картинками в таблице производителя и берут ту, что ближе всего. Несколько правил:
- Большинство бактерий на TTC-агаре растут красными колониями, но бывают и бесцветные. Их тоже учитывают.
- Оценивают плотность колоний, а не их размер.
- Если поверхность сплошь красная, это может быть сливной рост при очень сильном заражении, больше 10⁷ КОЕ/мл. Сравните с неиспользованной пластиной, чтобы не принять его за чистый агар.
- Плесень на второй стороне оценивают не числом, а степенью: слабое (+), умеренное (++) или сильное (+++) заражение. Плесень растёт пушистыми колониями, бледными, зелёными или чёрными, дрожжи чаще куполками. Дрожжи на этой стороне по таблице Mikrocount оценивают в КОЕ/мл, как бактерии.
- Надёжная нижняя граница метода около 10³ КОЕ/мл: меньшие количества дип-слайд различает плохо.
Если ожидается очень сильное заражение, больше 10⁷ КОЕ/мл, пробу можно развести. Инструкция Easicult Combi предлагает добавить 1 мл эмульсии в 100 мл питьевой воды, хорошо встряхнуть и уже в эту смесь опускать пластину. Результат тогда умножают на 100: если на пластине 10⁶ КОЕ/мл, в баке 10⁸.
Что делать при каждом уровне заражения
Единых норм нет, и пороги в руководствах немного отличаются. В таблице ориентиры британской инспекции по охране труда HSE и компании Fuchs и типовые действия.
| Бактерии, КОЕ/мл | Оценка | Что делать |
|---|---|---|
| меньше 10³ (1 000) | хороший контроль | обычный уход, следующий тест через неделю |
| 10³-10⁴ (1 000-10 000) | по HSE хороший контроль, по Fuchs уже «разумный» | следить за трендом, проверить концентрацию, pH и посторонние масла |
| 10⁴-10⁶ (10 000-1 000 000) | рост микрофлоры, умеренное заражение | довести концентрацию и pH до паспорта СОЖ, снять масло скиммером, проверить температуру и циркуляцию, повторить тест; если рост продолжается, ввести биоцид в дозе по паспорту |
| 10⁶ (1 млн) и выше | плохой контроль | действовать сразу: обычно слив, чистка и промывка системы, свежая заливка |
| Плесень ++ или +++ | заметное грибковое заражение | фунгицид по паспорту продукта и механическое удаление грибковых наростов из бака и фильтров |
HSE подчёркивает: биоцид не добавляют, пока не исправлены концентрация, pH, посторонние масла, загрязнение металлом, температура и циркуляция. Препараты для обработки собраны в разделе бактерициды, биоциды и фунгициды. Если дело дошло до слива, систему промывают очистителем систем подачи СОЖ, порядок описан в статье «Приготовление, хранение и замена СОЖ».
Как часто проверять
HSE рекомендует ставить дип-слайды раз в неделю. Реже можно, только если журнал замеров концентрации, pH и бактерий показывает, что эмульсия под контролем. Дополнительный тест полезен:
- через несколько дней после свежей заливки, чтобы знать исходный уровень;
- после добавления биоцида, чтобы проверить, подействовал ли он;
- перед длительной остановкой станка и после неё;
- при первых признаках проблем: запах, падение pH, слизь в фильтрах.
Особенно полезен регулярный тест на центральных системах, которые питают много станков: немецкий институт охраны труда IFA отдельно отмечает пользу подсчёта микробов именно для них. Заражение там обходится дороже всего, потому что под слив идёт весь объём системы.
Результаты записывайте в журнал вместе с концентрацией и pH. HSE советует хранить записи не меньше пяти лет: по ним видно, как меняется бак, и проще найти причину проблем. pH удобно мерить pH-метром для СОЖ, а как вести замеры концентрации, рассказано в статье «Как измерять концентрацию СОЖ».
Типичные ошибки
- Пробу берут с поверхности, где плавает масло. Плёнка на агаре искажает результат.
- Касаются агара пальцами или кладут пластину на верстак. На слайде вырастут микробы с рук и стола.
- Не дают стечь лишней жидкости, хотя инструкция Easicult прямо требует дать ей стечь и промокнуть последние капли.
- Читают грибковую сторону слишком рано. Дрожжам и плесени нужно не меньше 72 часов в инкубаторе.
- Не учитывают бесцветные колонии и принимают сплошной рост за чистый агар.
- Инкубируют то на подоконнике, то у батареи. При разной температуре результаты разных недель нельзя сравнивать.
Утилизация использованных слайдов
На пластине после инкубации могут вырасти болезнетворные микробы, поэтому пробирку не открывают и колонии руками не трогают. Производитель Mikrocount рекомендует уничтожать использованные пластины сжиганием или автоклавированием, порядок утилизации определяется местными правилами.
Частые вопросы
Можно ли инкубировать дип-слайд без инкубатора?
Можно при комнатной температуре, но ждать придётся дольше: по инструкции Mikrocount 2-4 дня для бактерий и 4-7 дней для грибков. Чтобы результаты разных недель можно было сравнивать, HSE советует инкубатор с постоянной температурой.
Сколько бактерий в СОЖ допустимо?
Универсальной нормы нет. Ориентир HSE: до 10⁴ КОЕ/мл хороший контроль, от 10⁶ плохой, при котором бак обычно сливают и чистят. Производители слайдов тоже пишут, что предельные значения определяются опытом конкретного производства.
Почему результат хороший, а эмульсия пахнет?
Запах сероводорода дают анаэробные бактерии, которые живут под плёнкой масла и в застойных зонах. На TTC-агаре растут в основном аэробные бактерии, а основная масса микробов сидит в биоплёнке на стенках и в шламе. Проверьте посторонние масла и застойные участки, при необходимости промойте систему.
Можно ли отправить дип-слайд в лабораторию?
Да. Пробирка с пластиной после отбора пробы служит транспортной средой: её подписывают и отправляют в лабораторию. Fuchs, например, описывает лабораторную инкубацию при 30 °C в течение 48 часов с последующей оценкой результата.
Можно ли пользоваться просроченными дип-слайдами?
Нет. Производители запрещают использовать слайды после даты на упаковке, а также пластины с пересохшим, изменившим цвет или отставшим от основы агаром.
Если тест показал рост бактерий, подберём биоцид или новую СОЖ и подскажем порядок промывки системы. Звоните: +7 (495) 135-25-88. Дип-слайды и другие средства контроля в разделе дип-слайды для СОЖ, доставляем по России.
